货号：SC705011

规格：50测试/盒

【产品概述】

核酸水解凝胶电泳法和紫外分光光度计法是Rnase检测领域中比较常用的检测方法。核酸水解凝胶电泳法受实验人员主观判断影响较大，无法准确定量，操作时间长，测定通量较低。核酸水解紫外分光光度法的灵敏度低，不适合微量核酸酶残留的活性检测。

本试剂盒以RNA探针为底物，当检品中存在核糖核酸酶时，RNA探针被降解，标记在探针上的荧光基团与淬灭基团分离（详见图1），产生荧光，该方法具有操作简便、准确性高、重复性好及高灵敏度等优点，可根据需求自由选择进行定性或定量检测。

（图1 检测原理图）

（图2  RNA酶活性残留检测试剂盒定量标准品检测曲线图）

（图3 RNA酶活性残留检测试剂盒定量标准曲线）

【产品特点】

1. 简便：样品制备及检测操作简单，一个小时内即可得到检测结果。

2. 准确：试剂盒检测原理基于底物RNA探针，无非特异性交叉反应，具有高准确性的特点。

3. 灵敏：试剂盒具有高灵敏度的特点，可以检测低至0.5 ng/ml的RNase样品。

4. 稳定：检测过程于微量PCR管中闭管操作，不受环境因素影响，结果稳定，重复性高。

5. 灵活：检测方式灵活，可根据需求自由选择进行定性或定量检测。

【RNase简介】

核糖核酸酶（简称RNase）是一类能够催化RNA水解反应的酶。RNase在生物体内或外源环境中广泛存在，能够对RNA进行大小、位置不同的切割，解除RNA中的化学键。在生物体内，RNase起到调控RNA代谢、稳定性等作用，因此在细胞内RNase活性的调控和平衡是维护正常生物功能的必要条件。RNase在生命科学研究中发挥着至关重要的作用，包括基因表达、RNA质量控制、RNA代谢和RNA调解等方面。

RNase根据其反应机理和物理性质可以分为RNA内切酶和RNA外切酶。RNA内切酶包括多种不同类型的内切酶，如RNase T1、RNase T2、RNase A、RNase B、RNase H和RNase P等，可以将RNA分子的主链切断成短链和单链产物。RNA外切酶可将RNA分子降解为短链和单链产物，主要包括RNase E、RNase J、RNase III和RNase PH等。

RNase在生物学研究中起着至关重要的作用。它可以消除或剪切mRNA中的异常区域，保证RNA质量的稳定性和完整性。RNase也可以促进基因的转录和翻译，使得DNA和RNA的信息能够顺利传导和表达。此外，RNase在RNA代谢和RNA稳定性方面也具有重要作用。在细胞凋亡过程中，RNase能够分解RNA和DNA，起到“自吞噬”的作用。在细胞生长和分裂过程中，RNase直接参与RNA的合成和转录过程，进而控制基因表达水平，维持生命的运转。

RNase在医学中也有许多应用。例如，因为RNase能够促进基因表达和转录，它可以用于肿瘤治疗中。研究表明，一些肿瘤细胞中的RNA水平非常高，导致肿瘤细胞的生长和繁殖。因此，使用RNase可以消除多余的RNA，从而抑制肿瘤细胞生长。其次，RNase还可以用于处理一些遗传疾病，如囊性纤维化等。通过将RNase引入患有囊性纤维化的人体内，这种疾病对呼吸系统和消化系统的严重破坏可以得到一定程度的改善。

【RNase残留的危害】

（1）实验室

RNase残留会对分子生物学分析和实验结果产生严重危害，首先，RNase可以降解RNA，并将其变得不可使用。即使只有微小量的RNase残留，也可能对RNA样本产生严重影响。这将导致假阴性结果，数据不准确，实验结果不可靠。RNase残留会干扰RNA样本的纯化和反转录过程，从而影响实验结果的准确性。在反转录的过程中，RNase会降解RNA，从而使反转录反应中的RNA没有被转录成对应的DNA。RNase在室温下可存活数周，这些残留物可能会污染实验室环境，如实验设备、试剂、手套、实验服和其他实验器具。

在实验室中，为了避免RNase污染，需要特别注意对实验室环境的卫生管理、器械的消毒、实验操作员的清洁等方面，使用RNase-free的相关实验耗材，以及定期对环境和相关耗材进行RNase残留的监控。

（2）生物制品生产企业

生物制品的生产过程中存在着多种杂质，例如质粒DNA、蛋白酶和RNase等。其中RNase活性极强，微量残留即可导致大量RNA的降解。RNase污染分为内源性和外源性两种，内源性污染指生物样本中含有的内源性RNase，可通过样本处理或添加RNase抑制剂/灭活剂来处理，而外源性污染来自于环境中的水、缓冲液、实验器皿等表面，源头广泛，包括微生物、人体毛发、皮肤碎屑和汗液等。同时，在部分生物制品的生产工艺流程中也会添加核酸酶，从而引入外源性核酸酶。

生物制品中残留的核酸酶会对产品的质量产生极大影响，以mRNA疫苗的生产为例，在生产过程中残留的RNaseA、宿主菌DNA、宿主菌RNA和宿主蛋白等，它们都会显著影响体外转录反应和转录mRNA的质量，需对产品的纯度进行严格的把关。

我国在《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则》、《人用基因治疗制品总论》、《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则》等法规中做出了针对核酸酶等杂质的相关规定，此外，欧洲药品监督管理局也出台了相应的法规要求。

【应用场景】

1）生物耗材RNase残留检测

2）生物试剂RNase残留检测

3）生物制品（疫苗、干细胞等）RNase残留检测等

【应用单位】